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糖原磷酸化酶a(GPa)试剂盒注意事项

点击次数:608次     发布时间:2020/2/19 17:00:00

 糖原磷酸化酶a(GPa)试剂盒注意事项:
测定意义:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。糖原的分解主要在GPa的催化下进行。

测定原理:
未添加激活剂时,GPa催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。
 
一般从以下几个方面来考虑:
①选择适当的测量波长。一般根据待测组分的吸收光谱选择zui大吸收波长作为测量波长。如果干扰组分在zui大吸收波长也有吸收,则应根据:吸收大,干扰小”的原则来选择测量波长
②调价溶液的浓度,或选用不同厚度的吸收池,控制被测是呀的吸光度在0.2-0.8范围内。
③选择适当的参比溶液。
在分析复杂样品时,如何消除干扰?
消除干扰方法主要有:
1、加入眼笔记,如加入配位掩蔽剂,使其与干扰离子生成测定波长物吸收的配合物,如加入氧化还原掩蔽剂,改变干扰离子的价态。
2、选择适宜的显色条件,如控制溶液的酸度等,使干扰离子与显色剂不发生反应。3、采用双波长或其他选择性的方法;
4、分离干扰离子。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月

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