当抗体活性下降,检测信号仅能达到正常工作信号的30%以下时,不建议继续尝试挽救,直接更换合格新抗体:

该状态下抗体有效结合位点已大量失活,强行继续使用会出现标准曲线线性R²<0.9、高低浓度信号差不足2倍的问题,*终检测数据完全失去定量参考价值。
直接更换新批次验证合格的抗体,重新按梯度滴定确定*优工作浓度,可快速恢复实验体系稳定性,避免无效重复实验浪费样本与试剂。
场景2:抗体轻微聚集可尝试救活
仅出现轻微聚集、未发生完全蛋白变性的抗体,可通过规范操作尝试恢复活性:
先将抗体溶液置于4℃条件下12000g高速离心15分钟,小心吸取中间层澄清液体,完全弃去管底的聚集沉淀,去除已形成的大颗粒聚集体。
向处理后的澄清抗体中加入试剂盒配套的含1% BSA的抗体稀释液,补充蛋白保护成分,轻柔吹打混匀后,用阳性对照样本预实验验证活性,确认信噪比达标后再正式上板使用。

