
🧪 不同类型标本的标准处理流程
血清标本:将采集的全血置于血清分离管中,室温放置2小时或4℃过夜,之后以1000×g离心20分钟,取上清即可直接检测;若需长期保存,可分装后置于-20℃或-80℃环境,严禁反复冻融。
血浆标本:使用EDTA或肝素作为抗凝剂采集血液,采集后30分钟内于2-8℃条件下以1000×g离心15分钟,分离得到的上清可直接检测,长期保存同样需避免反复冻融。
组织匀浆标本:用预冷的0.01M pH=7.4的PBS冲洗猪组织以去除残留血液,按1:9的重量体积比加入PBS(推荐在PBS中添加蛋白酶抑制剂),冰上充分研磨,可辅以超声破碎或反复冻融进一步裂解细胞,之后以5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
细胞培养上清等生物标本:采集后以1000×g离心20分钟,取上清即可检测,暂不检测的样本可置于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
⚠️ 标本处理核心注意事项
溶血标本绝对不可用于本次检测,溶血后裂解的红细胞会严重干扰*终OD值的测量结果。
标本建议在新鲜状态下检测,若发生细菌污染,菌体中的内源性HRP会引发假阳性反应,保存过久的样本蛋白易发生聚合,会大幅加深实验本底。
冻存的标本溶解后需缓慢轻缓混匀,避免产生气泡,禁止使用振荡器剧烈震荡,防止蛋白分布不均影响检测结果。
出现浑浊或有明显沉淀的标本,需提前离心或过滤澄清后再进行检测。

