核心原理
夹心法 (Sandwich ELISA)
此方法需要两种能识别同一抗原上不同表位的抗体。一种抗体（捕获抗体）被固定在固相载体上，用于“抓住”样本中的目标抗原。随后，另一种带有酶标记的抗体（检测抗体）再与已被捕获的抗原结合，*终形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
竞争法 (Competitive ELISA)
此方法基于“竞争”原理。样本中的未标记抗原与已知量的酶标记抗原共同竞争结合固相载体上有限的抗体结合位点。样本中待测抗原越多，能结合到固相上的酶标抗原就越少。
检测对象
夹心法： 主要适用于检测大分子抗原，如蛋白质、细胞因子、肿瘤标志物等。因为这些大分子结构复杂，拥有多个可供不同抗体识别的表位。
竞争法： 特别适用于检测小分子抗原或半抗原，如激素、药物残留、毒素、小分子代谢物等。这些小分子通常只有一个抗原表位，无法同时被两种抗体结合，因此不适用夹心法。
检测原理与流程差异
检测原理与流程差异
夹心法流程：
包被捕获抗体 → 加入样本（抗原被捕获） → 加入酶标检测抗体（形成“三明治”） → 显色检测。
竞争法流程：
包被抗体 → 同时加入样本（含待测抗原）和酶标抗原 → 二者竞争结合位点 → 洗涤后显色，颜色越浅表示样本中抗原越多。
三、性能特点对比
三、性能特点对比
总而言之，选择哪种ELISA方法主要取决于待测物的性质。对于具有多个表位的大分子蛋白，夹心法是高灵敏度和高特异性检测的首选；而对于只有一个表位的小分子物质，竞争法则是更合适的选择。
