1. 抗原抗体的精准识别
原理基础:试剂盒通过双抗体夹心或间接法实现特异性结合,小鼠支原体ELISA试剂盒采用预先包被的特异性捕获抗体,仅与样本中肺炎支原体抗体结合,不与其他病原体(如衣原体、病毒)抗体交叉反应。
抗体筛选:优质试剂盒的抗体经过严格筛选,
2. 交叉反应率低(关键指标)
行业标准:特异性强的试剂盒交叉反应率通常<5%,即对结构相似的物质(如其他支原体种属、小鼠内源性蛋白)无显著结合。

验证方法:通过检测高浓度的潜在干扰物质(如100ng/mL小鼠IgG、50ng/mL其他支原体抗原),其OD值应接近空白对照。
3. 样本基质的抗干扰能力
复杂样本适用性:可稳定检测血清、血浆、细胞上清等样本,不受基质中其他成分(如脂类、血红蛋白、细胞碎片)干扰。
回收率验证:在不同样本基质中加入已知浓度的标准品,回收率需在80%-120% 范围内(如南京博研生物的IL-4试剂盒回收率为93%-106%)。
📌 提升特异性的实验建议
小鼠支原体ELISA试剂盒严格遵循说明书稀释样本:高浓度样本可能因“钩状效应”出现假阴性,需按推荐倍数稀释(如1:100血清稀释)。
设置阴性对照:每次实验需同时检测空白对照(PBS)、阴性样本(健康小鼠血清),确保背景信号<0.1 OD值(450nm)。

