‌试剂质量‌：选择灵敏度高、特异性好、精密度（批内CV值小于15%）且稳定性好的试剂盒‌。不同厂家的试剂效果可能存在差异，建议通过比较多家产品进行选择‌。

‌说明书核查‌：仔细阅读说明书，关注回收率（通常应在80%-120%之间）、稀释线性（检测值与理论值百分比在80%-120%范围内）等质控指标‌。例如，R&D的IL-6试剂盒说明书会明确标注回收率和稀释线性数据‌。

‌批号与保存‌：优先选择长批号试剂，并确保保存条件（如4℃避光），避免反复冻融导致蛋白变性‌。

‌加样与温育‌：

加样时需使用微量加样器，避免气泡和交叉污染，先加稀释液后加标本。

温育温度需严格控制在37℃±2℃，时间按ELISAJIA检测试剂盒说明书要求，防止非特异性结合。

‌洗涤与显色‌：

洗板需彻底，洗液注满各孔，避免残留导致“花板”现象‌。

显色剂（如TMB）需临用前配制，避光操作，显色时间不宜过长‌。

‌ELISAJIA检测试剂盒封板与拍干‌：封板要严密，防止液体蒸发；拍干时使用干净吸水纸，避免污染‌。

‌质控品管理‌：质控品需充分混匀，避免反复冻融，且不能过期。

‌环境要求‌：保持实验室温度、湿度稳定，避免次氯酸等污染物接触酶标板‌。

‌仪器校准‌：定期维护洗板机、酶标仪等设备，确保检测精度。

‌ELISAJIA检测试剂盒样本类型‌：血清、血浆等样本需充分离心，避免纤维蛋白原干扰；避免溶血、细菌污染及反复冻融‌。

‌干扰物排除‌：注意内源性（如类风湿因子）和外源性（如溶血）干扰，可通过加标对照品评估回收率‌。
五、原料筛选与标准化

关键原料（如抗体、酶标记物、包被板）的纯度、效价和批次稳定性直接影响检测结果。供应商需提供合规资质，每批原料需通过功能性验证（如效价测定、交叉反应测试）。例如，抗体的亲和力和特异性需通过Western Blot或免疫组化验证，避免非特异性结合。