一、核心标志物与细胞群定义
造血干细胞（HSCs）
表型：Lin⁻Sca-1⁺c-Kit⁺ (LSK) 基础上，进一步结合 CD150⁺CD48⁻ 标志物（LSK/SLAM表型），可富集纯度约40%的HSCs。
功能亚群：包括长期造血干细胞（LT-HSCs）、中间态HSCs（HSCIT）和髓系偏向HSCs（HSCMyeloid）。
多能祖细胞（MPPs）
根据CD150、CD48、CD34、CD135表达差异，分为MPP1–MPP5等亚群，具有不同分化潜能。
定向祖细胞
髓系祖细胞：如CMP（CD34⁺CD16/32⁻）、GMP（CD34⁺CD16/32⁺）、MEP（CD34⁻CD16/32⁻）等。
淋系祖细胞（CLP）：需在Sca-1⁻c-Kit⁻（LSK⁻）细胞中分析CD135和CD127表达。
二、实验优化要点
仪器配置：推荐使用配备多激光器（如405 nm、488 nm、561 nm、637 nm）和25个荧光检测器的流式细胞仪（如NovoCyte Quanteon）以支持14色分析。
门控策略：需设置DUMP通道排除表达谱系标记物（如CD3、CD11b、B220、Gr-1、Ter119）的成熟血细胞。
样本处理：注意不同小鼠品系（如C57Bl/6与Balb/c）或实验条件（如体外培养）可能影响LSK表型的适用性。
三、应用与挑战
该技术可揭示HSPCs异质性，但需注意：
细胞含量极低（骨髓中每10,000个细胞不足1个HSCs）；
需结合功能实验（如集落形成、移植）验证表型结果。
如需进一步了解具体操作流程，可参考相关实验指南。
可以根据表面标志物表达，通过流式细胞的方法分析造血系统的各种细胞。流式细胞术对造血干/祖细胞（HSPCs）的精细分型为研究造血系统提供了强大工具。通过多色荧光标记技术，研究者可同时检测CD34、CD38、CD90、CD45RA等关键表面标志物的表达模式，从而将骨髓中的原始造血干细胞（CD34+CD38-CD90+CD45RA-）与各类定向祖细胞（如髓系祖细胞CD34+CD38+CD123+，淋系祖细胞CD34+CD38+CD10+）精准区分。
