维持 pH 稳定：ELISA 实验中，抗原、抗体的结合以及酶的催化反应都对 pH 值较为敏感。缓冲液能够提供稳定的 pH 环境，确保抗原、抗体的活性以及酶的催化活性处于*佳状态。例如，常用的磷酸盐缓冲液（PBS），其 pH 通常为 7.2 - 7.4，接近生物体内环境的 pH，能保证蛋白质等生物大分子的结构和功能稳定，使抗原抗体反应能特异性地进行，减少非特异性结合。

     提供离子环境：适当的离子强度对于抗原、抗体的正确折叠、构象维持以及它们之间的相互作用至关重要。缓冲液中的离子可以屏蔽蛋白质表面的电荷，防止蛋白质因电荷相互作用而聚集或变性，同时也有助于抗原抗体复合物的形成和稳定。例如，PBS 中的钠离子和磷酸根离子等，能够调节溶液的离子强度，使抗原抗体反应在合适的离子环境中进行。

    稀释和溶解作用：缓冲液可用于稀释样品、标准品、抗体和酶等试剂，使它们达到实验所需的浓度。同时，它能保证这些试剂在溶液中保持良好的溶解性，防止沉淀形成，确保实验的准确性和可重复性。比如，在将抗体稀释到工作浓度时，使用缓冲液可以使抗体均匀分散在溶液中，便于准确加样和与抗原的充分反应。

     减少非特异性吸附：合适的缓冲液可以降低样品和试剂在容器表面以及 ELISA 板孔表面的非特异性吸附。一些缓冲液中会添加牛血清白蛋白（BSA）、吐温 - 20 等物质，它们能够封闭 ELISA 板上的非特异性结合位点，减少抗原、抗体等与板孔的非特异性结合，从而降低背景信号，提高检测的特异性和灵敏度。