细胞形态的观察
在显微镜下，细胞的形态是判断其健康状态的重要指标之一。例如，悬浮细胞中的活细胞通常透亮有光泽，而死细胞则显得暗淡无光，甚至细胞膜破裂。对于贴壁细胞而言，活细胞能够很好地贴附在培养皿上，且细胞膜保持完整；相反，死细胞则无法贴壁，形态也会发生变化。此外，如果观察到细胞碎裂增多、黑点增多、形态改变、生长速度变慢等现象，则可能是受到了外源刺激物的影响，需要排查污染源。
细胞膜的完整性是判断细胞活性的关键因素。健康的活细胞其细胞膜应该是完整的，而受损的细胞膜则可能导致细胞内容物泄露，从而影响周围细胞的生长环境。通过显微镜观察，可以发现细胞膜破损的细胞往往失去原有的形态特征，表现为细胞质外溢或细胞膜破裂。
①形态饱满：细胞在正常生长时，其形态显得饱满，具有良好的贴壁生长特性，且无细胞变形或皱缩的明显迹象。这反映出细胞状态良好，能够适应当前的培养环境。
②分裂活跃：随着细胞数量的逐步增加，可以观察到细胞分裂活动旺盛，细胞的增殖导致细胞间隙逐渐缩小。这种状态通常表明生长条件较为理想，能够满足大多数的生长和实验需求。
细胞衰老状态
①形态调整：随着细胞逐渐衰老，其体积往往会增大，并开始形成空泡。同时，核染色质会出现浓缩并加深染色，这标志着细胞已开始步入衰老的进程。
②生长迟缓：在衰老状态下，细胞的分裂活动显著减少，生长速度明显放缓，进而导致细胞间隙扩大。这种变化需要引起研究者的重视，因为它可能会对实验结果和数据的准确性产生不良影响。
①细胞破裂：当细胞走向死亡，其细胞膜的完整性遭受破坏，导致细胞内容物外泄，使得细胞形态变得模糊不清。这一过程通常不可逆，标志着细胞健康状况的严重恶化。
②炎症反应：某些类型的细胞死亡会触发周围组织的炎症反应，表现为炎症细胞的浸润，进而造成局部组织的显著损伤。这种炎症反应可能进一步加剧细胞死亡和相关病理变化，为评估细胞健康状况和实验设计提供重要线索。
细胞污染的识别
在细胞培养过程中，污染是一个常见的问题。通过显微镜可以识别不同类型的污染。例如，细菌污染时，在显微镜高倍镜下可见到直径比细胞小的高度重复颗粒，并且这些颗粒会持续快速增多。同时，培养基的颜色可能会迅速变黄或变得浑浊。而真菌污染则表现为培养基里肉眼可见的霉菌菌落，显微镜下异物边缘呈扫帚边、树枝状。
细胞计数与形态学分析
为了更好地了解细胞群体的状态，通常还需要进行细胞计数和形态学分析。这通常需要使用特殊的染色技术和显微镜，如苏木精-伊红染色(HE染色)、免疫荧光染色等。通过这些技术，可以在显微镜下更清晰地观察细胞，并对细胞进行计数。细胞计数通常是通过对一定数量的细胞进行计数，并计算出平均值来完成的。形态学分析则是通过对细胞形态的观察和比较，来判断细胞的种类和状态。
使用相差显微镜观察活细胞
相差显微镜是一种特殊的显微镜，它利用光的衍射和干涉特性，将透过标本不同区域的光波的光程差转变为振幅差，使得细胞内部结构之间呈现清晰可见的明暗对比。这种方法非常适合于观察活细胞的动态变化，如细胞运动、细胞分裂、细胞膜变化、细胞死亡等过程。使用相差显微镜时，需要注意调整显。
细胞大小的测量
细胞大小的测量也是细胞状态评估的一部分。通过镜台测微尺（台尺），可以精确地测量细胞的大小。台尺中央部分刻有精确等分线，通常是将1mm等分为100格，每格长10μm，专门用于校正目镜测微尺（目尺）每格的实际长度。
在显微镜下，细胞状态的细微变化往往预示着更深层的生物学意义。除了上述常见的生长、衰老和死亡状态外，细胞还会展现出一些特殊的应激反应，这些反应同样值得研究者密切关注。
当培养环境发生变化时，细胞会迅速启动适应性调节机制。例如，在营养不足的情况下，细胞可能收缩变形，胞质内出现脂滴聚集；而在缺氧条件下，线粒体形态会发生明显改变，呈现出肿胀或断裂的特征。这些应激表现既是细胞对环境变化的直接反馈，也为优化培养条件提供了直观依据。
