如果细胞生长健康且达到了所需的汇合度，则可以进行传代培养和/或接种细胞以供实验使用。

        如果细胞尚未达到所需的汇合度，并且自上次传代培养以来已过去2-3天，则更换培养基并继续，直到达到所需的汇合度。

        如果细胞出现污染迹象，则应将其丢弃。

更换培养基

        培养细胞时需要定期更换培养基，以防止有毒代谢物（例如乳酸）的积累，并确保生长培养基成分的持续供应。细胞代谢物的积累通常通过pH指示（例如酚红）进行监测，并以此确定完成细胞培养基更换的合适时间。当细胞培养进入稳定传代阶段后，操作规范将直接影响实验数据的可靠性。对于贴壁细胞，传代时需先用PBS轻柔洗涤两次以去除残余血清，随后加入适量胰蛋白酶进行消化。消化过程中应在显微镜下密切观察细胞形态变化，当细胞间隙增大、边缘回缩时立即加入含血清的培养基终止反应。值得注意的是，不同细胞系对胰蛋白酶的敏感性存在显著差异，原代细胞通常需要将消化时间控制在3-5分钟，而永生化细胞系可能仅需1-2分钟。

实验步骤
1.吸取生长培养基。

        对于悬浮细胞，先将培养物转移至离心管，以200-250 × g的速度离心5分钟，去移除培养基。

        对于贴壁细胞，将培养容器略微倾斜，直接吸出培养基，注意不用完全吸干净。

2.重新添加新鲜的生长培养基。

        对于悬浮细胞，用适量新鲜生长培养基重悬细胞沉淀，混匀后转移到新的培养容器中。

        对于贴壁细胞，直接沿壁加入适量的新鲜生长培养基。

3.将培养容器及时放入培养箱中进行培养，继续监测细胞的生长情况和污染迹象。