1.实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风机运转5-10min再开始实验操作。
2.实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于空气的流通；实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。
3.每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。
4.操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。
5.CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，最后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。
6.定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
7. 严格遵守无菌操作规范，佩戴无菌手套和口罩，特别是在进行细胞传代、冻存及复苏等关键步骤时。手套一旦潮湿或破损，应立即更换，防止手部微生物污染细胞。
8. 尽量减少在细胞培养过程中的谈话和走动，避免外界空气中的微粒和微生物进入操作区域。同时，限制非必要人员的进出，保持超净台周围的相对无菌环境。
9. 对于频繁使用的移液器，要定期用75%酒精擦拭其外部和吸头安装部位，减少潜在的污染源。吸头应一次性使用，避免重复使用导致的交叉污染。
10. 记录并监控细胞培养过程中的各项参数，如培养箱的温度、湿度和CO2浓度，以及细胞的生长状态和形态变化。一旦发现异常，立即采取措施，如更换培养基、调整培养条件或进行细胞纯度检测，以迅速应对可能的污染问题。
加强实验室的清洁与消毒至关重要。每次实验前后，都要对实验台、移液器、离心机等常用设备进行彻底的清洁和消毒。同时，实验室的空气净化系统也应定期维护，确保无菌环境。
其次，严格控制实验用品的灭菌过程。培养基、血清等关键试剂在使用前需经过严格的灭菌处理，且应在无菌条件下进行分装和储存。此外，对于一次性使用的实验耗材，如吸管、培养皿等，应确保其包装完好无损，并在有效期内使用。
再者，规范实验操作是避免细胞污染的关键。实验人员在进行细胞培养时，应严格遵守无菌操作规范，如佩戴无菌手套、口罩和帽子，使用酒精棉球擦拭双手等。同时，应避免在培养箱附近进行剧烈的操作，以免带入污染。
最后，定期对实验室进行微生物检测也是必不可少的。通过定期检测，可以及时发现潜在的污染源，并采取相应的措施进行清除。此外，实验人员还应加强自我防护意识，避免在实验过程中受到污染物的侵害。
