血清中可能出现的沉淀物,是一个复杂而微妙的生物化学现象,它们往往揭示了样本在处理、储存或分析过程中的某些变化。这些沉淀物可能由多种成分构成,包括但不限于蛋白质聚集体、盐类结晶、脂质颗粒以及微生物污染等。
血清中可能出现的沉淀物
蛋白质在特定条件下,如pH值偏离正常、温度波动或存在某些化学物质时,可能会失去原有的溶解状态,相互聚集形成可见的沉淀。这些蛋白质聚集体不仅影响血清的透明度,还可能干扰后续的生化分析或免疫检测。
基于多年的实验研究,用于细胞培养的胎牛血清以及其它血清中可能会存在以下种类的沉淀物::(1)纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到 1-2mm,可以用肉眼观察到。因为血清都是在低温下进行收集和快速处理的,一些纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体)在处理过程中仍然处于溶解状态,当经过最后的过滤分装后,就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。(2)磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在 37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。(3)胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们也是血清中出现沉淀物的常见原因。这些沉淀物的形成往往与血清的处理、储存条件以及血清本身的成分特性密切相关。例如,胆固醇和脂肪酸酯的沉淀可能是由于血清在储存过程中温度的波动或长时间的冷藏导致的。这些成分在低温下溶解度降低,从而析出形成可见的沉淀。细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
(4)细胞状态不好,未提供细胞培养前 3 天照片的,不重发;
(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(6)细胞收到 2 天内,未告知,不重发;
(7)视具体情况而定
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一:冷冻管置于 4°C30-0 分钟→(-20°C30 分钟*)→-80°C16~18 小时(或隔夜)→液氮槽
vaporphase 长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降 1-3°C 至–80
°C 以下,再放入液氮槽 vaporphase 长期储存。*-20°C 不可超过 1 小时,以防止冰晶过大,造成细胞大
量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
除此之外,还有一些较为罕见的沉淀物,如硅酸盐或其他无机盐类,它们可能源于血清的采集、加工或包装过程中的污染。这些沉淀物虽然不常见,但一旦出现,同样会对细胞培养实验产生不良影响。
值得注意的是,血清中的沉淀物不仅影响实验的视觉效果,还可能对细胞的生长和增殖产生负面影响。因此,在实验过程中,应密切注意血清的质量,定期检查和过滤血清,以去除潜在的沉淀物。同时,选择高质量、经过严格筛选和处理的血清也是确保实验成功的关键。
综上所述,血清中可能出现的沉淀物种类繁多,了解这些沉淀物的性质、成因及其对细胞培养的影响,对于提高实验质量和准确性具有重要意义。