间接法是检测抗体时zui常用的方法,其原理为利用酶标记的抗-抗体检测已与固相结合的受检抗体。故称为间接法。操作步骤如下:
(1)将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。
(2)加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。
(3)加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如: 欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人lgG抗体。
(4)加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。
本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
小鼠血管紧张素转化酶(mouse ACE)
小鼠雄激素结合蛋白(mouse ABP)
小鼠促肾上腺皮质激素(mouse ACTH)
小鼠Active Caspase-3
小鼠Active Caspase-7
小鼠Active Caspase-8
小鼠激活素A(mouse Activin A)
小鼠脂联素(mouse Adiponectin)
小鼠抗线粒体抗体(mouse AMA)
小鼠抗核抗体(mouse ANA)
小鼠血管紧张素II(mouse ANG II)
小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2)