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脑视网膜血管瘤G7蛋白抗体 常用免疫组织化学方法的原理

点击次数:632次     发布时间:2020/7/30 15:40:29

脑视网膜血管瘤G7蛋白抗体常用免疫组织化学方法的原理:
1. 免疫荧光细胞化学技术:将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量。
2. 免疫酶细胞化学技术:是目前免疫组织化学研究中最常用的技术.脑视网膜血管瘤G7蛋白抗体基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。
3. 免疫胶体金技术:就是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究.由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究。
 高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,脑视网膜血管瘤G7蛋白抗体因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。
脑视网膜血管瘤G7蛋白抗体实验检测操作方法 :
1. 每个样品取2支流式检测管,分别注明同型对照和待测,两管分别加入106-7/100μl个待侧细胞(若细胞浓度低或加入的细胞悬液较多,可1200转/每分钟,10分钟低温离心,弃上清,保证100μl被检样品) 
2. 同型对照管中加入荧光标记同型对照抗体,做阴性对照;待测管中加入荧光标记的一抗,做为实验管,各加3μl (按抗体使用说明书,一抗可做选择几个梯度1:20、50、100倍稀释)混匀即可。 
3. 上机检测,先做同型对照,调整电压至阴性区范围,再测实验管即可。

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