PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐药株贴壁细胞
客户接收到细胞,用75원的酒精消毒(建议西配制75%酉精的水是灭菌过的
基颜色,显微濆观察细胞生长情兄,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100显微镜观察细胞,当细胞汇至80左右(可以传代的情兄下),细胞应该在37度培养箱予预温1-2ム后再做处理。 PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐药株如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培严格无菌操作,打开细胞培养瓶。PATB988/U人胰腺癌氯际定耐药株将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无茵容器中(建议换新的培养基培养细胞)/次轻轻洗细胞表面,加入适里的0.05胰-EDTA消化细胞,显微镜下观察細胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱培养
客户接收到细胞,用75원的酒精消毒(建议西配制75%酉精的水是灭菌过的
基颜色,显微濆观察细胞生长情兄,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100显微镜观察细胞,当细胞汇至80左右(可以传代的情兄下),细胞应该在37度培养箱予预温1-2ム后再做处理。 PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐药株如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培严格无菌操作,打开细胞培养瓶。PATB988/U人胰腺癌氯际定耐药株将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无茵容器中(建议换新的培养基培养细胞)/次轻轻洗细胞表面,加入适里的0.05胰-EDTA消化细胞,显微镜下观察細胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱培养
请收到细胞后,在倒置镜下(建议在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二) (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1.弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热, PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐药株之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代一般是一传二。