人眼小梁网细胞细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
弃去培养上清，用pbs或生理盐水清洗1-2次；
加入2ml0.25%胰酶t25瓶，使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
将细胞悬液1000rpm左右条件下离心4min，弃上清；
用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，t25培养瓶加6-8ml培养基；
悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、人眼小梁网细胞细胞细胞复苏：
将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
在1000rpm左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
弃去培养上清，用pbs或生理盐水清洗1-2次，加入1ml 0.25%胰蛋白酶t25瓶
1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
将细胞悬液1000rpm左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
人眼小梁网细胞细胞培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板每孔一片或培养皿中每个平皿可放置2-3片；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% co2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
