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放线共生放线杆菌PCR试剂盒设置 PCR 反应

点击次数:507次     发布时间:2020/5/21 15:53:28

放线共生放线杆菌PCR试剂盒设置 PCR 反应(40 uL 体系)  
 
1. 在 N+2 个 PCR 管中加入下列成分,下面以样品数为 1 举例(注意:如果第一次使用DNA 释放剂,*每个样品设置两个模板用量的 PCR 反应,两个反应的模板使用量差 10 倍,由此确定*用量,以后就用效果*的那个模板用量):

2. 
放线共生放线杆菌PCR试剂盒轻柔混匀后上机,按下面参数进行 PCR。


3. 放线共生放线杆菌PCR试剂盒电泳检测 PCR 产物,预期的 PCR 产物长度为 216bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,需要用通用引物(如真核生物专一 PCR 引物,需自备)测试是否有抑制剂或样品是否浓度达到 PCR 的要求,如果通用引物也扩不出来,需要浓缩并再次纯化 DNA 样品,或者更换 DNA 提取方法,直到通用引物能够扩增出预计大小的片段。

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