覆盖小鼠ELISA检测试剂盒洗刷技术、小鼠小胶质细胞M1/M2型诱导两大核心模块，适配小鼠神经炎症相关研究的全流程实验需求。

该方案针对小鼠样本ELISA检测优化，可有效降低背景噪音，保障小胶质细胞极化相关细胞因子检测数据的准确性。

洗涤液选用含0.05%吐温-20的PBS缓冲液，现配现用，避免长菌污染。

提前检查洗板机针头无堵塞、无变形，准备无碎屑的一次性吸水纸。

洗刷前先将板孔内反应液完全甩干，避免残留高浓度样本稀释洗涤液。

浸泡式洗刷：向板孔注满洗涤液，静置浸泡1~2分钟，甩干后在吸水纸上垂直拍干，重复3~4次，适配常规细胞因子检测。

流水冲洗式洗刷：将酶标板固定在冲洗装置上，用调试好水压的水流持续冲洗2分钟，再用蒸馏水浸泡2分钟后拍干，适配高背景的小鼠血清样本检测。

洗刷后立即进行后续加液操作，避免板孔长时间干燥导致抗原抗体复合物失活。

每一次拍干更换全新吸水纸，防止不同孔间交叉污染。

以常用的BV2小鼠小胶质细胞为实验对象，操作流程成熟稳定，可高效获得目标极化表型。

培养体系：DMEM培养基，添加10%胎牛血清、1%双抗（青霉素/链霉素）。

培养环境：37℃、5% CO₂的恒温培养箱，每1~2天换液一次。

传代方式：悬浮细胞直接吹打收集，贴壁细胞用胰酶消化3~5分钟，传代比例1:2~1:4。

细胞预处理：BV2细胞血清饥饿4小时，同步进行状态同步化。

诱导条件：加入终浓度10ng/mL的IFN-γ + 10μg/mL的LPS，共孵育48小时。

表型验证：镜下可见细胞胞体增大、突起变短，呈圆形或杆状；ELISA检测TNF-α、IL-12表达显著上升，IL-10无明显变化；流式检测CD80、CD86标志物高表达。

细胞预处理：BV2细胞血清饥饿4小时，同步进行状态同步化。

诱导条件：加入终浓度20ng/mL的IL-4 + 10ng/mL的IL-10，共孵育24~48小时。

表型验证：镜下可见细胞胞体偏长、突起细长；ELISA检测IL-10表达显著上升，TNF-α、IL-12无明显升高；流式检测CD206、CD163标志物高表达。

骨癌痛小鼠模型：造模后脊髓内小胶质细胞会自发出现M1极化占主导的失衡状态，术后28天可检测到M1标志物iNOS显著升高、M2标志物Arg-1表达下调。

氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠模型：P12返回常氧环境后M1小胶质细胞开始激活，P17达到峰值；P17后M2型小胶质细胞活性逐渐占据主导，P20达到极化高峰。