细胞核提取的核心原理就是利用细胞核的密度和质量比其他细胞器大得多的特点，通过差速离心让细胞核先沉淀下来，选择性裂解细胞质膜、保护核膜完整性，并借助离心实现物理分离。常用的方法主要有两种：

这是*经典的方法，通过逐步提高离心速度，让细胞核在较低转速下沉淀，而其他更小的细胞器则留在上清液中。

 

这种方法先用温和的去垢剂裂解细胞膜和胞浆膜，但保留更坚固的核膜。之后通过差速离心，细胞核就会沉淀下来，而胞浆成分留在上清液中。

 

这种方法利用蔗糖或甘油等介质形成密度梯度，细胞核在离心时会迁移到与自身密度相等的位置，从而实现更精细的分离。

主要用于核移植等特殊实验，比如克隆。它是在显微镜下用极细的吸管直接吸出细胞核，属于物理操作法。

5.化学保护与抑制
添加DTT、蛋白酶抑制剂（如Cocktail）、PMSF等防止核蛋白降解及氧化；

 

对于组织样本，需要先将其切碎并匀浆，然后通过一系列低温离心步骤（包括蔗糖垫层）来纯化细胞核，去除膜碎片和细胞杂质。

 

细胞核提取的本质是“温和裂解+精准分离”：先用低渗/去污剂（如NP-40）可控破坏质膜，再借蔗糖密度垫层或梯度离心物理富集完整细胞核；植物样本还需额外抗氧化与去杂步骤。