小鼠总蛋白C（TPC）ELISA试剂盒主要用于科研领域中对血清、血浆、组织匀浆等生物样本中TPC含量的定量检测。该方法基于抗原-抗体特异性结合原理，通过酶催化显色反应实现高灵敏度测定。不同厂家提供的试剂盒在细节上略有差异，但核心流程一致。小鼠总蛋白C（TPC）的ELISA实验做准备:
🧪 实验准备要点
核心参数与规格
检测范围：通常为 0.78 - 50 ng/mL（具体以说明书为准）。
灵敏度：0.1 ng/mL 左右。
样本类型：适用于血清、血浆、细胞培养上清等。
检测原理：双抗体夹心法。
常见规格：96T（96孔板） 和 48T（48孔板）。
保存条件：2-8℃ 避光保存，避免反复冻融。
有效期：通常为6个月（部分产品保质期180天，需确认说明书）。
小鼠总蛋白C（TPC）ELISA试剂盒关键注意事项
样本处理：避免溶血、脂血和反复冻融；血清样本需室温放置2小时或4℃过夜后离心。
试剂平衡：使用前将所有试剂和标本缓慢均衡至室温（18-25℃），不可直接在37℃溶解。
标准品复溶：冻干标准品加入稀释液后室温静置10分钟，反复颠倒/搓动以助溶解，浓度为10,000pg/mL（贮液）。
酶标板清洗：使用稀释后的洗涤液（如30倍稀释），充分洗涤4-6次，每次震荡/浸泡1-2分钟。
实验步骤概要
加样：空白孔加入100μl标准品/样品稀释液，其余孔各加入100μl标准品或待测样品，混匀后置37℃，60分钟。
弃液与洗板：弃去液体，甩干，用洗涤液充分洗涤4-6次，每孔加入350μl洗液，震荡/浸泡1-2分钟。
加酶标抗体：每孔加入100μl生物素标记抗体工作液，混匀后置37℃，60分钟。
再次洗板：同步骤2。
加酶结合物：每孔加入100μl酶结合物工作液，混匀后置37℃，30分钟。
显色与终止：加100μl TMB混合液，避光反应10-20分钟，加终止液后测定吸光度（O.D.值）。
小鼠总蛋白C（TPC）ELISA试剂盒样本收集与处理不同类型样本的前处理方式直接影响检测结果准确性：
标准曲线不理想：检查标准品是否正确复溶、稀释，避免反复冻融。
背景值高：优化洗板次数和时间，确保洗涤充分。
信号弱：检查抗体孵育时间、温度，或尝试延长显色时间。
