购买的抗体常以冻干粉形式提供，需在使用前进行溶解。不同厂家的冻干粉可能已含有稳定剂（如BSA）和防腐剂，因此溶解时只需加入适当的溶剂即可 。部分抗体为液体形式，无需再溶解。抗体溶解方法其实不难，核心就是用合适的缓冲液轻柔溶解，避免剧烈震荡或高温，保持抗体活性。
一、溶解缓冲液选择
常用缓冲液：PBS（磷酸盐缓冲液）或TBS（Tris缓冲盐溶液）*常用，能维持抗体稳定性。
特殊需求：如果抗体含冻干保护剂（如BSA、蔗糖），建议用含0.1% BSA的PBS溶解，减少非特异性吸附。
二、操作步骤
溶解前准备：
将抗体和缓冲液提前平衡至室温（20-25℃），避免温度骤变影响活性。
轻轻颠倒混匀抗体瓶，避免剧烈震荡产生气泡。
溶解过程：
用移液器吸取缓冲液，沿瓶壁缓慢加入抗体冻干粉中，避免直接冲击。
静置10分钟，再轻轻颠倒混匀，确保完全溶解。
分装保存：
溶解后分装成小份，避免反复冻融，-20℃或-80℃保存。
短期使用可4℃保存，长期保存建议-80℃。
三、注意事项
避免剧烈操作：溶解时轻柔混匀，防止抗体变性。
防止污染：使用无菌枪头和离心管，避免微生物污染。
现配现用：溶解后尽快使用，避免长时间放置导致活性下降。
四、常见问题
溶解不完全：可延长静置时间或轻微涡旋，但避免剧烈震荡。
抗体沉淀：若出现沉淀，可离心去除上清，重新溶解。
五、不同抗体类型的溶解建议
单克隆抗体：对剪切力敏感，建议用含0.1% BSA的PBS溶解。
多克隆抗体：对剪切力耐受性较强，可用PBS或TBS溶解。
六、溶解后验证
活性检测：通过ELISA或Western blot验证抗体活性。
浓度测定：用紫外分光光度计测定浓度，确保符合实验要求。
七、不同实验场景的溶解建议
ELISA：建议用含0.1% BSA的PBS溶解，减少非特异性吸附。
八、溶解缓冲液的优化
pH值：通常用pH 7.4的PBS或TBS，避免pH剧烈变化。
添加剂：可添加0.1% BSA或0.1% Tween-20，减少非特异性吸附。
九、溶解后的保存
短期保存：4℃可保存1周，避免反复冻融。
长期保存：-20℃或-80℃可保存1年，分装后避免反复冻融。
十、常见问题解答
抗体溶解后出现沉淀：可能是溶解不完全或缓冲液不合适，建议离心后重新溶解。
抗体活性下降：可能是溶解时剧烈震荡或保存不当，建议轻柔操作并分装保存。
