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细胞培养基保存的条件

点击次数:47次     发布时间:2025/11/18 10:46:58

细胞培养基的保存条件直接影响其稳定性和实验结果的可靠性,因此需要严格控制环境参数。以下是优化保存条件的几个关键要点:
 
1. 温度控制
未开封的干粉培养基应存放于2-8℃的干燥环境中,避免反复冻融导致成分降解。液体培养基若含热不稳定成分(如谷氨酰胺或生长因子),需分装后置于-20℃冷冻保存,使用前在4℃缓慢解冻以减少沉淀形成。
 
2. 避光与密封
培养基中的酚红、维生素等光敏成分易受紫外线影响,建议使用棕色瓶或铝箔包裹保存。开封后需严格密封,防止CO2逸散导致pH值升高,同时避免微生物污染。
 
3. 湿度管理

短期保存(1-2周)
‌温度‌:4℃冷藏是标准保存温度,可有效抑制微生物生长并防止成分降解‌。
‌注意事项‌:
需密封保存(如用封口膜或密封袋),避免污染和水分蒸发‌。
含热不稳定成分(如抗生素、维生素)的培养基建议现配现用,或2-3天内使用完毕‌。
琼脂平板需倒置冷藏,防止冷凝水滴落污染‌。
长期保存(数周至数月)
‌温度‌:-20℃或-80℃超低温冷冻,适用于需长期保存的培养基(如含血清培养基)‌。
‌注意事项‌:
含血清培养基需在-20℃以下保存,使用前需在2-8℃缓慢解冻‌。
分装保存可减少反复冻融对成分的破坏‌。

干粉培养基吸潮后易结块变质,应在干燥器中放置硅胶除湿剂,相对湿度控制在40%以下。配制好的液体培养基若短期不用,可添加0.1%的防腐剂(如叠氮钠),但需注意其对细胞活性的潜在抑制。
 
4. 分装策略
大包装培养基建议按实验需求分装为50-100mL的小份,减少多次取用带来的污染风险。分装时标注配制日期、批号及有效期,并遵循"先进先出"原则。
 
5. 质量控制
定期抽样检测保存培养基的pH值、渗透压及无菌性。若出现沉淀或颜色异常(如DMEM变黄),需过滤灭菌或弃用。对于重要实验,可预先进行细胞培养验证。
 
通过以上措施,能显著延长培养基的有效期并维持其性能。实验室还应建立标准操作流程(SOP),确保不同人员操作的一致性,从而保障实验数据的可重复性。
 

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