柠檬酸合酶（CS）测试盒的操作步骤主要基于酶联免疫吸附法（ELISA）或比色法，以下是具体流程及注意事项：
一、样本前处理（细胞悬液制备）

消化贴壁细胞

使用0.5%胰蛋白酶与0.2% EDTA按1:1混合液消化培养的贴壁细胞，使细胞脱离培养表面。

制备细胞悬液

加入适量Hanks液终止消化，轻轻吹打后制成单细胞悬液，调整浓度至与细胞计数要求一致。

台盼蓝染色

用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液，取0.1ml细胞悬液与新鲜染液混合（每0.1ml悬液加一小滴染液），室温染色3—5分钟。

染色后取一滴悬液滴于载玻片，加盖玻片，在高倍镜下观察：死细胞呈浅蓝色、膨大且无光泽，活细胞不着色、形态正常且有光泽。

细胞活力计数

统计至少1000个细胞中的活细胞比例，用于后续实验样本筛选。

反应体系构建

按试剂盒说明书要求，将处理后的细胞悬液与CS检测试剂混合（具体比例需参考试剂盒规格），确保体系均一。

显色与吸光度测定

CS催化乙酰CoA与草酰乙酸反应，生成的产物使无色DTNB转化为黄色TNB，在412nm处有特征吸光值。

使用可见分光光度计或酶标仪测定412nm处吸光度，全程约50分钟，可同时检测100例左右样本。
试剂配制：将测试盒中的反应缓冲液、底物溶液及辅酶溶液按说明书比例混合，轻柔涡旋混匀，确保试剂如交响乐般和谐反应。注意避光保存DTNB（5,5'-二硫代双-2-硝基苯甲酸），其稳定性如同薄纱般脆弱。