影响ELISA试剂盒曲线的因素主要包括试剂盒本身的质量、实验操作的细节以及环境条件等。以下是具体的影响因素：

试剂盒质量：

抗原、抗体活性对效价的影响：主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活，结果不易判断。ELISA法灵敏度高，对杂质的反应灵敏度也高，实验中空白对照OD值偏高或假阳性。

酶结合物浓度过高，也会导致OD值假性增高。

实验仪器：

ELISA试剂盒加样器是否经过校正，酶免测定血清用血量很少，如手工加样器的性能不好，吸取样品不准确，会使结果忽高忽低。

每次洗板前，应检查洗板机针孔有无堵塞。

操作因素：

加样：加样器的性能和操作者的技能都会影响结果。

温育：温度过高或过低，都可能影响抗原抗体的结合效率，从而导致曲线形态异常。

洗涤：洗涤不充分可能导致非特异性结合增加，背景值升高；而过度洗涤则可能损失部分结合物，造成信号减弱。

显色：显色时间和温度也会影响*终的OD值。

比色：比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽，特别是冬季板从37℃水浴箱取出时，底部留有水汽，应将板底擦干后进行比色，水汽或孔内气泡也会使OD值升高。

温度控制：

温度高于45℃易引起失活及标记物脱落，温度低于4℃，影响反应速度。

样本处理：

样本的处理方式，如样本的稀释比例、保存条件等，也会影响*终的检测结果。

综上所述，影响ELISA试剂盒曲线的因素众多，且这些因素往往相互作用，共同决定了实验结果的准确性和可靠性。因此，在实际工作中必须操作规范、仔细，避免和排除各种因素的影响，使之得到准确可靠的检验结果