ELISA（酶联免疫吸附测定）作为一种高度特异且灵敏的生物分析技术，其间接法测抗体模式在生物医学研究中占据举足轻重的地位。这一模式巧妙运用了抗原-抗体反应的特异性以及酶促反应的放大效应，为检测生物样品中特定抗体提供了强有力的工具。
基本方法的操作如下:
1．将病原体的抗原在碳酸盐缓冲液中4~C过夜包被，形成固相抗原，洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗原后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭，洗涤去除未结合的部分及杂质。
2．加入含待测抗体的临床样本如血清等，温育一定时间后洗板；此时，待测抗体就会与固阳上特异抗原反应而吸附于固相上。
3．加入酶标记的抗人IgG抗体，温育一定时间后洗板；此时，在固相上即形成固相抗原—待测抗体—酶标二抗复合物。
4．加入酶底物，温育显色测定(图2—6)。
间接法测抗体在目前应用最多的是丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)以及梅毒螺旋体抗体等的测定。从上述的测定模式可见，间接法测抗体，严格地讲，所测定的仅为抗体的IgG类，不涉及IgM和IgA类，这是由酶标二抗体所决定的。
影响间接法测定抗体的一个较大的因素是包被抗原的纯度。现在间接法测抗体中所使用的抗原一般均为基因工程重组抗原，如HCV的3，4，5，HIV的gp41和gpl20和梅毒螺旋体Tl5，Tl7，T47等。基因工程抗原在纯化时应尽量去除用来表达的宿主如大肠杆菌的抗原，以免由于机体存在对这种宿主抗原的抗体而引起假阳性反应。此外，由于机体的IgG类抗体浓度较高，其中绝大部分为机体接触外界环境刺激所产生的非特异IgG，因此，为避免这些高浓度非特异IgG对固相的吸附所致的假阳性反应，通常需对待测样本做一定程度的稀释。
在间接法ELISA中，首先，将待检测的抗原固定于固相载体表面，形成一层均匀的抗原膜，宛如铺设了一条通往特异性识别的桥梁。随后，待测样品中的抗体（目标分子）如同敏锐的侦探，穿梭于样品之中，一旦遇见其对应的抗原，便迅速结合，形成抗原-抗体复合物，这一过程犹如锁与钥匙的完美契合，展现了生物分子间的高度专一性。
紧接着，引入一种酶标二抗，它如同携带了信号放大器的侦探助手，能够特异性地识别并结合到已结合抗原的抗体上，形成更为复杂的夹心结构。这一步骤不仅进一步加固了抗原-抗体间的联系，更为后续的酶促显色反应埋下了伏笔。
最终，在底物溶液的催化下，酶标二抗上的酶发挥其催化作用，将无色的底物转化为有色产物，颜色深浅与待测抗体浓度成正比，宛如一幅生动的画卷，直观地展示了抗体存在的痕迹与量级。这一过程，犹如化学魔法般，将微量的生物信息转化为可量化的视觉信号，极大地提高了检测的敏感性和准确性。
综上所述，ELISA间接法测抗体以其独特的优势，在疾病诊断、疫苗效果评估、免疫学研究等领域发挥着不可替代的作用，是生物医学研究中不可或缺的强大工具。
