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分双抗夹心法、间接法、竞争法区分

点击次数:65次     发布时间:2024/8/5 16:51:06

     近年来,ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点得到了广泛的应用。ELISA可用于测定抗原,也可以用于测定抗体。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可以分为双抗夹心法、间接法、竞争法等常见几种类型。
 
    那么,这几种常见类型分别适用于哪些实验?这些类型的优缺点又是什么呢?今天小编就和大家一起来了解下双抗夹心法、间接法、竞争法。
 
 
双抗体夹心法测抗原:双抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法,适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
 
   双抗原夹心法测抗体:反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备,应根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。
 
   间接法:是检测抗体zui常用的方法,本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。作为检测抗体领域中的璀璨明珠,不仅是医学诊断工具箱中不可或缺的一大利器,更是现代传染病防控体系中的智慧结晶。此法巧妙地利用抗原与抗体之间犹如锁钥相合的特异性结合原理,构筑起一道精准识别病原体抗体的坚实屏障。在纷繁复杂的生物分子海洋中,间接法如同一位敏锐的侦探,悄无声息地搜寻着那些潜藏在体液中的微量抗体线索,为传染病的早期诊断与防控铺设了坚实的基石。
 
具体而言,间接法通过引入一种已知且纯化的病原体抗原作为“诱饵”,巧妙地设置了一场“分子级别的钓鱼游戏”。当待测样本中的抗体“鱼儿”游弋至此,它们会被抗原“诱饵”紧紧吸附,形成稳定的抗原-抗体复合物。随后,借助一系列精心设计的检测步骤,如荧光标记、酶促反应放大信号等高科技手段,这些复合物如同夜空中最亮的星,被一一捕捉并量化分析,从而精准地揭示出样本中抗体的存在与否及其浓度水平。
 
正是凭借这种高度特异性和敏感性的双重优势,间接法在传染病诊断领域展现出了无与伦比的魅力与实力。无论是隐匿于血液中的病毒痕迹,还是潜伏于体液深处的细菌抗体,都难逃其法眼,使得临床医生能够迅速而准确地作出诊断,为患者的及时治疗与康复赢得宝贵时间。
   竞争法测抗体:当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。抗HBe的检测一般采用此法。
 
     竞争法测抗原:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。
 
 

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