羰基与2,4-二硝基苯肼反应生成红色2,4-二硝基苯腙，在370nm处有特征吸收峰。

 

自备实验用品及仪器

 

天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水，无水乙醇，乙酸乙酯。

 

试剂组成和配制

 

提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

 

试剂一：粉剂0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根据样品数，每支加1mL水溶解，每支为10个样品用量）

 

试剂二：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。

 

试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。

 

试剂四：液体25mL×1瓶，4℃保存。

 

试剂五：根据测定样品量，将乙酸乙酯和无水乙醇等体积混合。

 

试剂六：液体100mL×1瓶，4℃保存。

 

样品处理

 

1.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，于4℃，4000g离心10min，取上清，加入0.1mL试剂一，室温放置10min，4℃，10000g离心10min，取上清待测。

 

2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

 

3.血清等液体样本：直接测定。