上海莼试生物技术有限公司
技术文章《返回
蛋白磷酸酶抑制剂混合液实验步骤

点击次数:396次     发布时间:2022/3/1 15:58:04

蛋白磷酸酶抑制剂混合液实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
内吞作用辅助蛋白EPN1抗体
内吞作用辅助蛋白EPN2抗体
内质网定位蛋白ERGI3抗体
内质网氧化物蛋白Ero1-Lα抗体
内质网蛋白ERp19抗体
内质网蛋白ERp72抗体
结核分枝杆菌分泌性蛋白ESAT6抗体
真核翻译起始因子1抗体
上皮粘连调控蛋白ESRP2抗体
T细胞和嗜酸性粒细胞表达特应性皮炎蛋白ETEA抗体
电子转移黄素蛋白脱氢酶抗体
EGF毒素受体7跨膜结构域蛋白1抗体
乙醇胺激酶2抗体
磷酸化Ets转录因子家族ets1抗体
磷酸化上皮细胞癌转化蛋白2抗体
嗜酸性粒细胞过氧化物酶抗体
核酸内切酶G抗体
酪氨酸蛋白激酶受体A10抗体
胞吐囊复合体蛋白2抗体
磷酸化4E结合蛋白1抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
泛素交联酶抗体
EB病毒核抗原抗体-3B抗体
 

联系我们

联系人:高小姐

手    机:13585831301

Q      Q:3004967995

座    机:021-59541103

传    真:021-60443211

地    址:上海市嘉定区澄浏公路52号中科院技术转移中心24号楼