1）复苏细胞：将含有 1mL。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 上述操作方案的数据可作为参考，实际操作已实验室配备的耗材为准，

2. 冻存时含 10%DMSO,事先加 9ml 培养液是为了稀释 DMSO，理论上 1%DMSO

对细胞性

3. 隔着 PE 手套能有效防止水浴过程中导致污染

4. 重悬的体积只是作为参考，具体的根据需要可进行调整

5. 由于复苏过程中已经离心，第二天可根据实际情况选择换液或者不换液（主要针对贴壁细胞）