试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中ADIPOR1表达。用纯化的ADIPOR1抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中ADIPOR1相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的ADIPOR1抗体结合,形成抗体 抗原 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中ADIPOR1的存在与否。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作程序:
操作步骤:
1.ADIPOR1 猪脂联素受体1酶联免疫试剂盒编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50%l。然后在待测样品孔先加样品稀释液40%l,然后再加待测样品10%l。加样将样品加 于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50%l,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50%l,再加入显色剂 B50%l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50%l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.
测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。
测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
注意事项:
1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 1530 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。
保存条件及有效期:
1.ADIPOR1 猪脂联素受体1酶联免疫试剂盒试剂盒保存:;28℃。
2.有效期:6 个月