特性:
激发和发射波长:*大激发波长为 490nm,*大发射波长为 516nm。
分子量:671.88。
染色特点:染色效果不依赖于线粒体膜电位,具有良好的灵敏度和特异性。
背景信号:背景信号低,对线粒体有良好的选择性。
使用方法:
储存液配制:使用无水 DMSO 将 Mito-Tracker Green 配制成终浓度为 1mM 的储存液,并在 - 20℃或更低温度下避光保存。
工作液配制:将储存液按比例加入细胞培养液或适当溶液中,使*终浓度为 20-200nM。工作液使用前需在 37℃预温育。
线粒体荧光标记:去除细胞培养液,加入预温育的染色工作液,与细胞在 37℃共孵育 15-45 分钟。去除染色工作液,加入新鲜细胞培养液后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察。
注意事项:
固定影响:Mito-Tracker Green 仅用于活细胞染色,固定会导致荧光消失。
细胞状态:染色效果受细胞状态和实验条件影响,长时间孵育或高浓度可能导致细胞杀伤事件。
荧光淬灭:荧光染料存在淬灭问题,需尽量避光操作。
储存条件:储存液在 - 20℃避光保存,有效期为半年。避免反复冻融