通常基于 PCR 技术或荧光定量 PCR 技术。利用特异性引物与支原体的特定核酸序列结合，在 PCR 反应体系中经过变性、退火、延伸等步骤进行扩增。若样本中存在支原体，就能扩增出特定核酸片段，通过荧光信号或凝胶电泳等方式检测到扩增产物，从而判断样本是否被支原体污染。

快速：能在较短时间内得出检测结果，通常只需数小时，大大缩短检测周期。

操作简便：一步法设计简化操作流程，减少人为误差和污染机会。

灵敏度高：可检测到低水平的支原体污染，保证检测准确性。

准备样本，如细胞培养液、细胞裂解液等。

将样本加入到试剂盒提供的反应体系中。

按照说明书设置合适的 PCR 反应条件进行扩增。

对扩增产物进行检测和结果判读。

严格按照说明书操作，确保试剂的储存和使用条件符合要求。操作过程中注意防止交叉污染，使用一次性耗材。