检测原理
方法一:铵态氮在强碱介质中与次氯酸钠和苯酚反应,生成水溶性蓝色染料靛酚蓝,该染料在 630nm 处有特征吸收峰,吸光值与铵态氮含量成正比。
方法二:利用氨基酸的 α- 氨基与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,在 570nm 处有特征吸收峰,通过测定吸光度来计算氨基酸含量,进而反映铵态氮含量。
操作步骤
样本处理:称取适量植物样本,加入提取液,匀浆后离心,取上清液待测。
试剂准备:根据试剂盒说明准备试剂,确保试剂的有效性和准确性。
加样与反应:按照操作表加入试剂和样本,混匀后在特定温度下反应一段时间。
吸光度测定:使用可见分光光度计,在相应波长下测定吸光度。
结果计算:通过标准曲线计算铵态氮含量。
注意事项
实验前建议进行预实验,确保样本吸光值在测量范围内。
试剂溶解后需在规定时间内使用,避免试剂失效。
操作过程中需注意加样的准确性和反应条件的控制。
不同试剂盒可能有不同的要求,需严格按照说明书操作。