特性:
荧光增强:与细胞膜脂质双层相互作用后,荧光强度显著增强。
光稳定性:荧光信号稳定,不易受到光漂白的影响。
低毒性:对细胞的毒性极低,通常不会影响细胞的正常生理功能和生存力。
细胞膜通透性:能够快速穿透细胞膜并插入到脂质双层中。
应用:
细胞膜标记:用于观察细胞的形态和行为,适用于多种细胞类型。
细胞示踪:用于标记和追踪神经元及其突起,以及其他类型的细胞。
其他应用:检测细胞的融合和粘附,检测细胞迁移,通过 FRAP 检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
使用方法:
标记活细胞:将细胞与 DiO 染色液混合孵育,通常使用浓度为 1-30μM,*常用的浓度为 5-10μM,染色时间通常为 5-20 分钟。
检测:孵育完成后,用 PBS 洗涤细胞以去除未进入细胞内的 DiO,然后用无血清培养基或 PBS 重悬细胞,在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。
固定细胞:DiO 染色后可进行多聚甲醛的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。
注意事项:
DiO 对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于 DiI,有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。
储存条件:应储存在避光、干燥、低温的环境中,通常保存在 - 20℃或更低温度。