订购信息：
| 产品名称 | 生长特性 | 价格 |
| SK-OV-3+luc 人卵巢癌细胞荧光素酶标记 | 贴壁生长 | 电询 |
培养条件：
培养基准备准备 McCoy's 5A 培养基，添加优质胎牛血清（10%）和双抗（1%）。气相为空气（95%）和二氧化碳（5%），温度为 37 摄氏度，培养箱湿度为 70% - 80%1。
产品描述：
SK - OV - 3 细胞由 G.Trempe 和 L.J.Old 在 1973 年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。该细胞种属来源为人，组织来源是卵巢。
细胞特性
细胞形态：呈现上皮细胞样，生长特性为贴壁生长。
细胞抗性：对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。
致瘤性：在裸鼠中致瘤，且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
荧光素酶表达：稳定表达萤火虫荧光素酶，性状稳定，培养时不需要添加抗生素维持，可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。
细胞规格
含量为 1x10^6 细胞数，规格为 T25 瓶或者 1mL 冻存管包装。
药筛浓度
SK - OV - 3 - LUC - BSD - LUC 细胞 bsd 药筛浓度为 4.0μg/ml，培养过程中可不用再添加 bsd，如若担心抗性随着传代时间降低，可定期用 2μg/ml 浓度 bsd 维持；SK - OV - 3 - LUC - EGFP 细胞 PURO 药筛浓度为 4.0μg/ml，培养过程中可不用再添加 PURO。
运输和保存
运输方式
冻存管包装：1mL 冻存管包装干冰运输。
复苏好存活细胞：T25 瓶复苏的存活细胞常温发货。
保存方法
冻存管包装：收到后 - 80 度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，需立即与供应商联系。
T25 瓶复苏细胞：收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
培养基及培养冻存条件
冻存液
采用 90% 血清和 10% DMSO 现用现配。
细胞接收后的处理
观察与消毒
收到细胞后，用 75% 酒精消毒瓶壁，将 T25 瓶置于 37℃ 培养箱放置约 2 - 3h。若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，需拍照后及时联系供应商。
在 4 或 5X 显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各 2 - 3 张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
细胞处理
低生长密度：镜下观察细胞的生长密度若在 60% 以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中），加入新配制的完全培养基 6 - 8mL，放到细胞培养箱中继续培养。
高生长密度：若细胞生长密度达 70% - 80% 以上，可以对细胞进行传代处理，传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。收到细胞后第一次传代建议 T25 培养瓶 1:2 传代。
细胞培养操作
复苏细胞
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主：
将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃ 水浴中迅速摇晃解冻，加 4mL 培养基混合均匀。
在 1000rpm 条件下离心 3min，弃去上清液，加 1 - 2mL 培养基后吹匀。
然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 6cm 皿中，加入约 4mL 完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。
细胞传代
如果细胞密度达 80% - 90%，即可进行传代培养：
细胞生长至覆盖培养瓶的 80% 面积时，弃 25cm² 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次。
添加 0.25% 胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min。
弃上清，沉淀细胞用 12ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，放入 37℃，5%CO₂ 细胞培养箱中培养。
上海莼试生物技术有限公司
