订购信息:
产品名称 | 生长特性 | 价格 |
大鼠皮肤成纤维样细胞;RS1复苏(支原体阴性报告) | 贴壁生长 | 电询 |
培养条件:
完全培养基配置
RPMI1640 培养基;添加 15%胎牛血清;添加 1%双抗。
产品描述:
来源:RS1 大鼠皮肤成纤维样细胞来源于一只大鼠的皮肤组织,于 2007 年由中国科学院昆明细胞库建立。
支原体、细菌、酵母和真菌检测:检测结果为阴性。
包装信息:通常以 1×10⁶ 个细胞/T25 培养瓶的规格进行包装。
细胞特性
形态:呈现成纤维细胞样。
生长特征:属于贴壁生长类型。
传代比例/细胞消化:传代比例建议为 1:2 传代,消化时间约为 2 - 3 分钟。
倍增时间:每周传代 2 至 3 次。
是否为肿瘤细胞:是。
培养步骤
细胞复苏
将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补加 1 - 2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代
未超过 80%汇合度:将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留 5ml 完全培养基,放入 37℃、5%CO₂ 孵箱培养4。
细胞密度超 80%:
贴壁细胞:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1 - 2 次。
添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1 - 2ml 至培养瓶中,置于 37℃培养箱中消化 1 - 2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加 5ml 以上完全培养基终止消化。
轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,在 1000RPM 条件下离心 5 分钟,弃去上清液,补加 1 - 2mL 完全培养基重悬。
将细胞悬液按 1:2 的比例进行分瓶传代(两个 T25 瓶),补充新的完全培养基至 5 - 8ml/瓶,放入到 37℃、5%CO₂ 的细胞培养箱中培养。
悬浮细胞:收集细胞,1000RPM 条件下离心 8 - 10 分钟,弃上清液,后续操作可根据实际情况进行。
保存和应用
保存
新鲜原代细胞:客户收到细胞后应立即将其放入 CO₂ 细胞培养箱内静置 2 - 3h,再进行后续的实验操作。
冻存细胞:客户收到细胞后应立即将其放入液氮、 - 80℃冰箱或立即进行复苏。
应用
该细胞只可用于科研,不得用于其他非科研用途。
RS1细胞复苏步骤
根据相关文献和产品说明,RS1细胞的复苏步骤如下:
准备工作:
确保实验室环境清洁无菌。
准备好37℃水浴锅、离心机、培养基(如RPMI1640培养基)、胎牛血清(FBS)、双抗等必需试剂。
复苏操作:
从液氮罐中取出冻存管,并迅速将其置于37℃水浴中解冻,直至冻存管中的内容物完全解冻2。
解冻后,用75%酒精擦拭冻存管外壁进行消毒。
将冻存管中的细胞悬液转移至含有5ml完全培养基的15ml离心管中,在1000rpm条件下离心5分钟3。
离心后弃去上清液,加入1-2ml完全培养基重悬细胞。
将细胞悬液接种至T25培养瓶中,加入约8ml完全培养基,放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养过夜1。
后续处理:
第二天更换新鲜的完全培养基,并检查细胞密度和生长状态。
根据需要进行传代培养或实验操作。
三、支原体检测与报告
为了确保细胞质量,通常会对细胞进行支原体检测。RS1细胞在建立时已经进行了支原体检测,并确认为阴性1。此外,在购买细胞时,供应商通常会提供一份详细的质检报告,其中包括支原体检测结果。