上海莼试生物技术有限公司
热卖产品最新促销最新推荐
感受态细胞 > 表达感受态细胞 > EPI300感受态细胞
产品名称:
EPI300感受态细胞
型号:
CS-G043
生产地址
国产
产品价格
产品简介
EPI300感受态细胞
产品详情

一、概述:

订购信息:


产品名称

生长特性

价格

 

EPI300感受态细胞

贴壁生长

电询


保存条件

一般需 - 80℃保存,该条件下一年内有效,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低;同时要避免反复冻融。


产品描述:

EPI300感受态细胞是一种E.coli 即用型化学感受态细胞,其英文名是EPI300 Super Competent Cells 或 EPI300 Chemically Competent Cell。
产品优势
扩增长质粒DNA及低得率质粒
可以用于高效扩增长度高达145kb质粒DNA以及在常规菌株中得率偏低的质粒克隆。
调节质粒拷贝数
含有一个突变的trfA基因,该基因表达的蛋白产物可以促进含有oriV复制子质粒的高拷贝复制。在非诱导情况下,当含有oriV复制子质粒的EPI300菌株在LB/2YT或SOB培养基中生长时,trfA基因的表达被抑制,oriV复制子质粒的拷贝数维持在很低的水平;当在培养基中加入诱导剂后,oriV复制子质粒的拷贝数可维持在很高的水平,进而提高了质粒产量。因此,EPI300菌株可以降低oriV复制子质粒的拷贝数,特别适合于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆。
操作方法
转化操
从 - 80℃拿出EPI300感受态细胞,迅速插入冰中,融化时间有所不同建议5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底混匀,冰中静置25分钟。
42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,期间晃动会降低转化效率。
向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15h。

标签:EPI300感受态细胞 

联系我们

联系人:高小姐

手    机:13585831301

Q      Q:3004967995

座    机:021-59541103

传    真:021-60443211

地    址:上海嘉定区嘉罗公路1661