ASPC-1/GEM人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株是一种来源于胰腺转移灶腹水腺癌的细胞系，具有上皮细胞样的形态，能够贴壁生长。这种细胞株是在一个胰腺癌病人的腹水中提取的细胞移植到裸鼠后建立的。以下是关于该细胞株的一些详细信息：

1. 细胞特性：
   • 来源：ASPC-1耐药筛选。
   • 形态：上皮细胞样，贴壁生长。
   • 含量：1×10⁶细胞数。
   • 污染检测：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
2. 细胞运输、保存及注意事项：
   • 干冰运输及复苏好存活细胞，1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。
   • 收到细胞后，应先检查培养瓶/冻存管的外观和细胞状态，并拍照存档。如有问题，应及时联系供应商。
   • 复苏细胞充液培养基为不含药物的维持培养基，收到细胞后应及时更换为完全培养基。
3. 细胞耐药诱导过程：
   • 通过递增药物浓度（0.03μg/mL、0.3μg/mL、1.5μg/mL、3μg/mL、6μg/mL、12μg/mL、18μg/mL）进行耐药筛选，约10个月后，细胞能在18μg/mLGEM药物浓度下稳定生长，从而构建成功耐药细胞株，并命名为ASPC-1/GEM。
4. 细胞培养试剂的配制：
   • GEM药物的配制及保存：建议将GEM药物配制成18mg/mL的母液，即使用1mLDMSO溶液溶解18mgGEM药物，注意避免反复冻融导致药物失效。
   • 冻存液的配制：90%优质胎牛血清+10%DMSO，现用现配。
   • 完全培养基的配制：推荐使用特定的培养基配方，如iCell-h005-001b。
5. 细胞处理方法：
   • 细胞复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4~6mL完全培养基的离心管中混合均匀，1000rpm/min离心3~5min，弃去上清液。
   • 细胞传代：当细胞密度达到80%~90%时，进行传代培养，使用胰蛋白酶消化后，将细胞悬液按1:1的比例均匀铺于新的培养瓶/皿中。
   • 细胞冻存：细胞冻存时，步骤同细胞传代，但需加入配制好的细胞冻存液，重悬细胞，分配到冻存管中，并记录相关信息

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