产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
8%-16%梯度预制胶,12孔 | Precast Protein Gels, 8%-16%, 12 wells | 1盒(10块) | CS-01F99249 |
本品通过pH中性缓冲液制备,丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺配比是29:1,其规格为浓缩胶5%,分离胶8-16%,胶板尺寸10×8cm,凝胶厚度1 mm,12孔梳齿,单孔最大上样量25 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液,蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad,天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比,使用预制胶具有以下优点:1)即开即用,不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固,节省了宝贵的时间和精力;2)不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂(丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺:神经毒性和遗传毒性;TEMED:强神经毒;过硫酸铵:可严重损伤呼吸道,眼睛,皮肤);3)大规模生产,胶与胶之间重复性好,质量稳定,不像手工灌胶那样结果差异大。 使用方法 1)剪开包装取出胶,撕去胶板底端橙色胶纸,将预制胶固定在电泳槽中,加入电泳缓冲液没过梳齿部位,双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢(一定要慢,否则会将胶齿拔断或拔歪)拔出,在前后板的上方中央卡上一个“V”型卡(通过加固前后板,不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙,还可稳定跑胶质量,电泳过程中“V”型卡不可取出),上样后进行电泳,电泳后取出胶板,用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开,将胶取出,弃去塑料板。 2)电泳:使用《分子克隆》指定的tris-glycine电泳缓冲液(tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%),也可使用我司的Western Blot电泳电转通用缓冲液(SY0360)。推荐使用低压100V,15min换高压150V跑至电泳结束。 3)转膜:使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液(含 20%甲醇或乙醇),操作与实验室原有操作完全相同。也可以使用我司的Western Blot电泳电转通用缓冲液(SY0360),无需添加甲醇,无需冰浴,但是需要另行添加20%乙醇,恒压80V电转60 min。 |
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