端粒酶蛋白催化亚基（TERT或TRT）具有反转录酶的主要特征，其表达在正常细胞中受到抑制，研究表明，TERT或TRT的表达与端粒酶活性的表达一致，与端粒酶的活化程度密切相关。Wisman等在人卵巢癌中利用逆转录PCR检测hTERT的mRNA的表达，并采用TRAP法检测端粒酶活性，结果证实二者均存在于恶性肿瘤中并且表达模式相同。基于上述原理，实时荧光定量PCR端粒酶检测试剂盒通过检测TERT的mRNA表达水平来间接反应端粒酶的活性。

实时荧光定量PCR（SYBR Green Real-time PCR）方法以其卓越的快速性及定量性被广泛应用于科研领域，使用本试剂盒可以准确简便地进行mRNA的表达分析。试剂盒采用SYBR Green qPCR Master Mix为荧光实时定量PCR和Two-Step荧光实时定量PCR设计的最优反应体系，并结合特异性的细胞端粒酶催化亚基基因TERT引物，简化实验步骤和提高实验效率。Master Mix含有Maxima Hot Start Taq DNA聚合酶、dNTPS、进行优化处理的PCR反应缓冲液以及SYBR Green染料。使用Hot Start Taq DNA聚合酶，为PCR反应提供了更高的产量和灵敏度、特异性，能够检测低至10个拷贝的目的基因。

本试剂盒适应于大多数的Real-time PCR扩增仪，包括Applied Biosystems，Eppendorf，Corbett，Bio-Rad，Roche，杭州博日（Line-GeneBioer）等品牌的PCR扩增仪。

备注：

建议采用25μL的实验体系，如果改变请参照其余说明进行调整。

主反应混合液Master mix含有除模板、引物外的全部组分，避免其反复冻融和污染是进行一个成功实时定量PCR反应的重要步骤。

PCR扩增仪设定时需要建立起始10分钟、95℃的变性程序以激活Maxima Hot Start DNA聚合酶。

一般实时定量实验中采用适宜体系确保Maxima qPCR Master Mix的最小化，避免产生大量的荧光强度。

针对不同实验条件和仪器型号重新调整荧光阈值。
当使用Bio-Rad的iCycler iQ或MyiQ system时请按照仪器生产商的说明进行实验。