上海莼试生物技术有限公司
热卖产品最新促销最新推荐
分子生物学试剂 > 克隆与表达 > PAGE预制胶(8-16%)
产品名称:
PAGE预制胶(8-16%)
型号:
CS-01F99237
生产地址
国产
产品价格
电议
产品简介
PAGE预制胶(8-16%)现货供应,价格实惠。
产品详情

一、概述:

  产品属性: 

产品名称

英文名称

规格

货号

PAGE预制胶(8-16%)

 

10gel×10

CS-01F99237

PAGE预制胶是一款高性能的小型聚丙烯酰胺凝胶,能满足客户上样量大的需求。其独特的胶板设计可以提高条带分辨率,改善样品在上样孔里的分布状态,使得条带更加均匀。该预制胶采用独特的凝胶缓冲系统,比常规的Tris-Glycine系统具有更强的缓冲能力,在pH中性条件下灌注,能够更好地减少聚丙烯酰胺的降解,提高凝胶稳定性。本PAGE预制胶不含有SDS,依赖于采用合适的电泳缓冲液和相应试剂,是SDS-PAGE和非变性凝胶电泳的理想材料。依赖特有的灌注技术可以保证预制胶批次间稳定性和条带分布一致性。本PAGE预制胶兼容实验室最为常用的Tris-Glycine电泳缓冲液,而不必使用昂贵的Tris-MOPSTris-MES电泳缓冲液,有效降低成本。独特的凝胶配方,可以高电压电泳,25-30分钟完成电泳,能够实现高效、可靠地分离蛋白质,便于后续染色或转膜检测。

PAGE预制胶提供不同浓度的梯度胶和固定浓度胶。梯度胶的浓度包括4-20%4-12%8-16%;固定浓度胶包括8%10%12%15%。每种浓度的预制胶有12个点样孔。胶板尺寸:长×宽×高为100 × 80 ×50 mm;凝胶尺寸:长×宽×厚为80×70×1 mm

产品特点:

1、适用范围广:配合不同电泳缓冲液,能进行变性和非变性电泳适合大多数小型电泳槽

2、高分辨率:蛋白条带分离更为清晰和均一

3、超快电泳:可以260-300V高电压电泳,25-30分钟结束电泳

4、超长保质期:室温可稳定保存6个月,2-8℃可保存24个月

5、重复性高:不同批次预制胶的一致性好
6、物美价廉:兼容Tris-甘氨酸缓冲液,节约实验成本

实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀  
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。产品仅用于科研
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。

标签:PAGE预制胶(8-16%) 10gel×10孔 

联系我们

联系人:高小姐

手    机:13585831301

Q      Q:3004967995

座    机:021-59541103

传    真:021-60443211

地    址:上海嘉定区嘉罗公路1661