本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料，可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA的产率，纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

储存条件：室温(15～25℃)，有效期12个月，2～8℃保存时间更长。

操作步骤：

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1．称取土壤样本0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成细粉末，加入450μL溶液A震荡混匀。

  注：也可直接称取样本0.1-0.5g于离心管(建议使用2ml圆底管)，加入450μL溶液A剧烈震荡混匀1-2min至没有固体块。使用液氮研磨效果最佳。

2．加入50μL溶液B充分颠倒混匀(不要剧烈震荡)，65℃水浴6min，每2min充分颠倒混匀一次。

3．加入100μL溶液C充分颠倒混匀(不要剧烈震荡)，12000rpm离心10min。

4．将上清转移到新的离心管，12000rpm离心2min。

5．在吸附柱中加入200μL溶液D，将离心后的上清加入到带有溶液D的吸附柱中，用移液器吹吸几次混匀，12000rpm离心1min。

6．将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱(必须)，12000rpm离心1min。

7．倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液500μL，12000rpm离心1min。

8．倒掉收集管中的废液，重复步骤7两次(共漂洗三次)。

9．倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管，12000rpm离心2min。

10．拿出吸附柱在室温干燥数分钟(因季节及气候等因素不等)，或50℃干燥1min。

11．将吸附柱放入一个新的离心管中，加入50-100μL洗脱液(65℃预热)，12000rpm离心1min。

12．将离心管中的液体重新加入到吸附柱中，12000rpm离心1min。离心管中即为土壤微生物DNA溶液。

13．若产物PCR效果差，可以适当稀释DNA产物，或添加1/10体积的PCR增强剂。

注意事项：

1．新鲜的土壤样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。

2．若溶液中出现浑浊可在37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。

3．在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响产物纯度。

4．洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL，体积过小会影响回收效率；建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液，用水洗脱也会损失部分产物；DNA应保存在-20℃避免反复冻融，以防降解。

5．若产物含有腐殖质残余则会严重影响DNA的光吸收值，应采取电泳检测和分光光度计检测相结合的方式鉴定。
6．液体试剂避免接触皮肤，若意外接触应立即使用大量清水冲洗。