产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
柱式细菌DNA提取试剂盒 | Column Bacterial DNA Isolation Kit | 50次 | CS-01F99065 |
介绍
本产品是在在"百无忧"细菌DNA提取试剂盒 基础上开发的柱式升级产品,可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
特点: 1. 操作简单,整个过程不到20分钟。 2. 产率一般在5-20μg/mL 过液培养的饱和菌液(10^8~10^9个细胞)。 3. OD260/280一般在1.8以上,可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。 4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。 5. 每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌,也可以使用菌落。 6. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。 7. 安全无毒,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。 保存条件:常温(溶菌酶干粉需要4℃或-20℃保存),有效期一年。 自备试剂:氯仿、自备无菌水 使用方法: 注意:溶液A和溶液B 容易产生沉淀,溶液B 十分粘稠,均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。 一、对革氏阴性细菌样品,不需用溶菌酶 1. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL塑料离心管中, 12,000rpm室温离心1分钟沉淀细菌,弃上清。 2. 加入300uL预热的溶液A 到细菌沉淀中,充分吹打均匀。 3. 再加入150uL预热的溶液B 到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B 比较粘稠,可以采取称量方法取用,150μL约等于150-160 mg。也可以将1mL 枪头剪去一截再吸取。 4. 65℃放置3-5分钟。如果室温放置,DNA 产量会降低10-20%。 5. 加入200μl 自备氯仿,震荡混匀10-30 秒,此时溶液将呈乳白色。 6. 12,000rpm 室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL 塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。 7. 加入1.5 倍体积(约0. 7mL)的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。 8. 12,000rpm 室温离心1分钟,DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。 9. 将0.5mL 通用洗柱液加入离心柱中,12,000rpm 室温离心1分钟,弃穿透液。 10. 重复上步操作一次。 11. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL 离心管中。 12. 加50-100μl 通用洗脱液,室温放置3-5分钟。 13. 12,000rpm 室温离心1分钟即得DNA 溶液。 14. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。 |
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