实验前准备及重要注意事项：

1、向蛋白酶K 中加入5ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。

2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。

3、本试剂盒最多可以提取1-5ml全血样品，如需提取大量血液样本请选用血液基因组非柱式提取试剂盒(#WE0176)。

4、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。

5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请置于56℃水浴重新溶解。

6、如下游实验对RNA污染较敏感，可加入4μl DNase Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。

7、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。

操作步骤：

1、向离心管(自备)中加入1-5ml血液样品，加入3倍体积的Buffer RCL轻轻涡旋或颠倒混匀。

2、3000 rpm(～900×g)离心10分钟，小心吸弃上清。

3、向沉淀中加入400μl Buffer GR，重悬沉淀。

注意：如果下游试验对RNA敏感，可加入4μl RNase A(100 mg/ml)溶液，震荡15秒，室温放置5分钟。

4、1-2ml血液样本提取时,向以上溶液中加入40μl 蛋白酶K ，混匀；2-5ml血液样本提取时,向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ，混匀。

5、加入400μl Buffer GL，颠倒混匀15次，剧烈涡旋震荡至少1分钟。

注意：不要直接将蛋白酶K 直接加入到Buffer GL中。
6、70℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。