产品特点：

1、适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。

2、可以处理0.1-1ml的液体样本，配置的高效微量吸附柱洗脱体积可低至20μl。

3、纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。

实验前准备及重要注意事项：

1、向蛋白酶K 中加入5ml的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置。

2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取量下降。

3、本试剂盒可以提取0.1-1ml液体样品。

4、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解。

5、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。

6、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。

7、实验开始前请将水浴锅预热至60℃。

8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃后使用。

操作步骤：

1、向离心管(自备)中加入20μl 蛋白酶K 。

2、加入200μl血清/血浆样本。

注意：当样品量超过200μl时，请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量，具体试剂加入量可参考附表。

3、加入160μl Buffer CL，颠倒混匀，剧烈震荡至少30秒。

4、60℃孵育30分钟，其间颠倒混匀数次。

注意：200μl 血清/血浆样本60℃孵育10-15分钟即可。

5、加入360μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇)，震荡至彻底混匀。

6、冰浴5分钟，短暂离心，使管壁和壁盖上的液体集中到管底。

7、将步骤6所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

9、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

10、向吸附柱中加入750μl 无水乙醇，12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。

注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应。

12、将吸附柱置于新的离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μl Buffer EBL或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

注意：

1)如果下游实验对pH值敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。

2)将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃后使用,且离心之前室温孵育5分钟，可以增加产量。

3)如果要提高DNA的终浓度，可以将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer EBL洗脱并于-20℃保存。