产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
鼠尾基因组DNA提取试剂盒 | Mouse&Rat Tail Genomic DNA Extraction Kit | 50次 | CS-01F99053 |
介绍
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的小鼠或大鼠鼠尾中提取高纯度的总DNA。该试剂盒提供的方法简单易行,纯化过程无需苯酚或氯仿抽提,可获得最大为50 kb的DNA片段,同时对100 bp的片段也能有效回收。本试剂盒采用独特的裂解液,有效裂解鼠尾样本,优化的缓冲体系使裂解鼠尾后产生的DNA高效结合到硅基质吸附柱上,而其他污染物可流过膜;PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可得到高纯度的DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
自备试剂:无水乙醇
产品特点 1、专用于从大鼠或小鼠的鼠尾中分离纯化高纯度总DNA。 2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀,彻底去除污染物及下游反应抑制物,快速提取高品质DNA。 实验前准备及重要注意事项: 1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。 2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。 3、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。 4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。 操作步骤: 1、取一段大鼠或两段小鼠长度为0.4-0.6 cm的尾巴,在液氮中研磨成细粉或剪碎放入离心管(自备)中。加入180μl Buffer GTT,振荡混匀。 注意:确保组织的起始量不要超出推荐范围。 2、加入20μl 蛋白酶K ,涡旋振荡,彻底混匀。 3、置于56℃水浴,直至组织溶液完全清澈,一般情况下需要消化6-8小时,孵育过程中涡旋震荡,使样品均匀分散。 注意:1)如果孵育和涡旋震荡后仍然有胶状物质,必要时过夜消化或再加入20μl 蛋白酶K 消化,不会影响后续操作。 2)如需去除RNA,在上述步骤完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液,震荡混匀,室温放置5-10分钟。 4、12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,以除掉未消化的类似于鼠毛等组织。将上清转移到一个新的离心管(自备)中。 5、加入200μl Buffer GL,涡旋震荡,充分混匀。加入200μl无水乙醇,涡旋震荡,充分混匀。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。 |
标签:鼠尾基因组DNA提取试剂盒 50次
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