自备仪器及试剂：

1、手动单管操提取：

1)恒温混匀仪

2)2/15ml磁力架

3)异丙醇、无水乙醇

2、手动96孔深孔板提取：

1)恒温混匀仪

2)废液抽吸系统

3)手动连续分液器

4)电动连续分液器

5)手动连续分液器分液管(25ml)

6)96孔深孔板磁力架

7)异丙醇、无水乙醇

实验前准备及重要注意事项：

1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配置好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。

2、异丙醇与Magbeads混合物的制备(以制备提取10个样品所需量为例)

1)向合适容量(加入异丙醇和Magbeads后总体积小于离心管容积的2/3)的离心管中加入3.3ml【0.3×(10+1)=3.3】的异丙醇。

注意：如用移液器加入异丙醇，需用移液器将枪头在异丙醇吹吸两次后再缓慢吸取异丙醇。

2)向上一步的离心管中加入220μl【20×(10+1)=220】Magbeads

注意：Magbeads加入前需涡旋振荡20秒使其充分混匀，异丙醇与Magbeads混合物使用前需涡旋振荡20秒钟使其成为均一的溶液。

3)异丙醇与Magbeads混合物使用前需涡旋振荡10秒钟使其成为均一的溶液。

3、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻、离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。

4、样品应避免反复冻融，否则会导致提取得到的DNA片段较小且提取得率低。

5、次使用前应按试剂瓶标签在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇并做好标记。

6、如Buffer ML中出现沉淀，请在56℃水浴锅中重新溶解，摇匀后即可使用。
7、实验过程中，磁珠在溶液中的充分混匀对于提取的得率与纯度都有很大的影响。实验过程中务必使磁珠与溶液充分混匀。不同厂家生产的恒温混匀仪震荡混匀效果有一定差异，实验过程中请注意观察磁珠状态。如出现磁珠贴壁等未充分混匀的现象，请用移液器吹吸混匀或调整震荡频率。