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产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
柱式冻存血液DNA提取试剂盒 | Frozen blood DNA column extraction kit | 50次 | CS-01F99023 |
血液DNA是重要的研究材料,但是血液DNA在常温下存放的时间很短,因此很多血液样品都是冻凝存放。由于冻存过程中形成的冰晶会刺破细胞膜,释放出DNA,因此从冻存血液中高效提取DNA一直是个棘手的问题。本产品就是北京我公司开发的专门用于从冻存血液中提取DNA的试剂盒。
产品特点: 1.适用于各种动物血液,包括禽类和昆虫。 2. 微量提取,每次可处理400μL 血液。 3. DNA 完整性好,纯化后长度在20-50 Kb 之间。 4. DNA 纯净,OD260/OD280在1.8-2.0 之间,可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。DNA产量一般在10μg/mL 血液。 5. 操作简单,整个过程约20分钟,室温操作,适合大规模样品处理。 储存条件:常温运输和保存,有效期一年。 使用方法: 1.从-20℃或更低的冰箱中取出血液样品,室温下静置融化。 2. 将400μL 解冻的血液转移到一个1.5mL的塑料离心管中,加入400μL溶液A,充分震荡混匀。如果是禽类血液,则少加10倍,只加40μL。 3.在混合液中加入400μL溶液B和200μL 氯仿(自备),振荡1分钟。由于离心管比较满,所以需要确保管底溶液转动起来,否则只是液面振动而已。 4. 4℃12000 g离心10分钟,小心将上清转移至一新的1.5mL塑料离心管 中。注意:最好不要室温离心,如果室温离心,则离心后部分样品的中间白色层可能会很厚,只能得到很少的上清。 5. 将约0.7-0.8mL上清转移到10-15mL塑料离心管中(不要使用玻璃离心管,否则DNA 会吸附到管壁上。常用的培养提质粒用的细菌的培养管即可)。 6. 加入2.5倍上清体积的溶液C(2mL),立即摇晃混匀。 7. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次0.7mL左右,转移后静置2-5分钟,以使DNA与膜充分结合,然后室温12000 g离心30秒,弃收集管中的废液,然后再加入0.7mL,重复上述操作,直到全部混合液挂柱。 8.在离心吸附柱中加入0.7mL 通用洗柱液,室温12000 g离心30秒,弃收集管中的废液。 9.在离心吸附柱中再加入0.3mL 通用洗柱液,室温12000 g离心30秒,弃收集管中的废液。 10.室温12000 g离心30秒,去尽残留液体(此步骤十分重要,不要省略,否则残留的含乙醇的通用洗柱液将抑制后续的酶反应)。 11. 将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管中,加入50μL DNA 洗脱液2.0,室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0在65℃预热后再使用,洗脱DNA的效果更佳。 12.室温12000 g离心30秒,离心管底部溶液即DNA溶液,可立即使用或-20℃长期保存。 |
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