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产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取) | Marine animal DNA column extraction kit | 50次 | CS-01F99020 |
本试剂盒是在柱式动物DNA提取试剂盒(BTN71206)试剂盒基础上优化改良而得,专门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒,可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取,可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。
产品特点: 1.使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作,如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。 2.操作简单安全,1小时内即可获得超纯的基因组DNA,纯化过程中不需要使用苯酚氯仿等有机试剂。 3.应用广泛,适用于多种动物细胞和动物组织等。 4.性价比高,质量和国外同类试剂盒相当,价格更低。 储存条件:常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输,-20℃保存),有效期一年。 使用方法: 使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。 1.切取不多于30mg的组织材料,放入装有200μL溶液A的离心管中,涡旋振荡15秒。注意:根据提取的组织不同,起始量也稍有不同,腮的细胞量较大,一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA,可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客户自备,BTN3160),振荡15秒,室温放置5分钟。 2.加入20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL),涡旋混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置,直至组织完全溶解,简短离心以去除管盖内壁的水珠,再进行下一步骤。注意:不同组织裂解时间不同,通常需0.5~2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全,虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2~3次,每次振荡混匀15秒。 3.加入200μL溶液B,充分颠倒混匀,70℃放置10分钟,溶液应变清亮,简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意:加入溶液B时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置时会消失,不会影响后续实验。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。 4.加入200μL无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。 5.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放回收集管中。 6.向离心吸附柱中加入500μL溶液C(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中。 7.向吸附柱中加入600μL通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中。 8.重复操作步骤7。 9.将吸附柱放回收集管中,12000rpm(~13400×g)离心2分钟,倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。 |
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