产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
柱式昆虫DNA提取试剂盒 | Insect DNA column extraction kit | 50次 | CS-01F99019 |
本试剂盒是专门用于从昆虫、节肢动物、蛔虫、扁形虫和一些富含多糖的动物组织中提取基因组DNA的试剂盒。其原理是基于去垢剂在适当的离子强度条件下,特异地跟基因组DNA结合形成沉淀,然后在用硅胶膜离心吸附法进行进一步纯化得到DNA。
产品特点: 适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的动物,包括昆虫、节肢动物、蛔虫、扁形虫等。 除新鲜样品外,还适合于各种保存状态的样品,包括冷冻的样品、用乙醇保存的样品和福尔马林保存的样品。 提取到的基因组DNA完整性,长度一般在20~50 Kb。 DNA纯净,OD260/280一般都在1.8左右,可直接用于PCR、酶切、杂交等。 操作简单,整个过程约30分钟。 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。 保存条件:常温运输及保存,有效期一年。 使用方法: 称取0.1~0.3g昆虫样品转移到塑料研钵中,液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。 注意:最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵,因为DNA会吸附在表面,影响得率。 在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。 65℃保温5~30分钟,其间最好吹打混匀2~3次。 12000~15000g室温离心3分钟。 将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。 在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色混浊状。 将其置于冰浴中放置5~10分钟。 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。 加入0.2mL的氯仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物,小心转移上清到新1.5~5mL塑料离心管中。 注意:由于下一步要加1.5倍体积的溶液C,所以新的离心管的体积要足够大。 加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀,然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。 每次转移0.7~0.8mL混合液后,室温放置5~10分钟。 12000~15000g室温1分钟,弃穿透液。 对需要多次上柱的样品,可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中,重复第12~14步的操作。 将0.7mL通用洗柱液加入离心柱,室温离心1分钟,弃穿透液。 在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤)。 空甩1分钟去除残留液体。 将离心柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加入30~100μL DNA洗脱液2.0。 室温放置5分钟后离心1分钟,管底即为昆虫DNA溶液,可立即使用,也可长期保存在-20℃。 |
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